دانلود پایان نامه ارشد:تاثیر حشره کش های میکروبی Bacillus thuringiensis,Beauveria bassiana, Metarhizium anizopliae برپروانه مینوز

فهرست نمودارها ز

فهرست شکل ها س

چکیده ص

فصل اول: کلیات پژوهش

مقدمه 1

فصل دوم : ادبیات و پیشینه پژوهش

2-1)حشره آفت 3

2-1-1) مناطق انتشار 3

2-1-2)اهمیت اقتصادی 3

2-1-3) شکل شناسی 4

2-1-4)زیست شناسی 6

2-1-5)نحوه خسارت 8

2-1-6)مقایسه مگس مینوز و پروانه مینوز گوجه فرنگی 12

2-1-7 )کنترل 13

2-1-7-1)روش های فیزیکی 13

2-1-7-2) روش های زراعی 13

2-1-7-3)کنترل بیولوژیک 13

2-1-7-4) تله های فرمونی 14

2-1-7-5) کنترل شیمیایی 15

2-2- قارچهای پاتوژن حشرات 16

2-2-1)تاریخچه استفاده از قارچ ها برای کنترل حشرات زیان آور 16

2-2-2)قارچ های بیمارگر حشرات 17

2-2-2-1) قارچ Beauveria bassiana 18

الف)قدمت و اهمیت 18

ب)برخی از جدایه های گونه B.bassiana در ایران 20

ج) شکل شناسی و زیست شناسی 20

د)هاگ زایی قارچ 21

ه)طیف میزبانی 22

2-2-2-2) قارچ Metarhizium anisopliae 22

الف) قدمت واهمیت 22

ب) شکل شناسی 23

2-2-3) نیاز های زندگی قارچ های بیماری زای حشرات 24

2-2-3-1) نیازهای غذایی 24

2-2-3-2) نیازهای محیطی 25

2-2-3-3) سایر عوامل محیطی موثر بر قارچ 27

2-2-4) مراحل ایجاد بیماری 27

2-2-5) مسیرهای ایجاد آلودگی 27

2-2-6)استقرار اسپور در سطح بدن حشره 28

2-2-7) انباشته شدن قارچ در حفره عمومی بدن 28

2-2-8) علائم بیماری و تاثیر عوامل محیطی 29

2-3)استفاده از باکتری به منظور کنترل میکروبی آفت 29

2-3-1)باکتری Bacillus thuringensis 30

2-3-1-1) تاریخچه Bacillus thuringensis 31

2-3-1-2)Bacillus thuringensis چگونه کار می کند؟ 32

2-3-1-3)Bacillus thuringensis پناهگاهی برای محصولات 33

2-3-1-4)کریستال های Bacillus thuringensis 33

2-3-1-5) گیاهان تراریخته Bacillus thuringensis 33

2-3-1-6) ریسک های بالقوه ناشی از کاربرد Bacillus thuringensis 34

2-3-1-7) مشخصات باکتری و توکسین آن 34

2-3-1-8)طرز تهیه B. thuringensis 34

2-3-1-9) موارد مصرفی باکتری در کنترل میکروبی 35

2-3-1-10)مزایا و معایب استفاده از B. thuringensis 35

فصل سوم : فرآیند پژوهش

3-1) حشره میزبان(جمع آوری و پرورش آزمایشگاهی) 37

3-2)قارچ های بیمارگر 39

3-2-1) جمع آوری و شناسایی قارچ 39

3-2-2) کشت و نگهداری جدایه ها 39

3-2-3)تهیه سوسپانسیون هاگ 40

3-2-4) آزمایش زنده مانی 42

3-3) روش زیست سنجی 42

3-4)روش تجزیه و تحلیل داده ها 43

3-5) آزمایشات اولیه تعیین غلظت های محدوده LD50 44

فصل چهارم : یافته های پژوهش

1-4)ارزیابی اثر قارچ M.anisopilae بر روی لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی 45

2-4)ارزیابی اثر قارچ M.anisopilae بر روی لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی 48

3-4)ارزیابی اثر قارچ B.bassiana بر روی لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی 51

4-4)ارزیابی اثر قارچ B.bassiana بر روی لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی 53

5-4)ارزیابی اثر باکتری B.t بر روی لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی 56

6-4)ارزیابی اثر باکتریB .t بر روی لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی 59

فصل پنجم : بحث ونتایج

نتیجه گیری کلی 62

پیشنهادات 66

پیوستها

داده های تحقیق 67

منابع

فارسی 73

لاتین 74

چکیده انگلیسی 85

فهرست جداول

عنوان صفحه

جدول 1-3) تیمارهای قارچی و باکتریایی بکار رفته در آزمایشات اولیه 44

جدول 1-4) میانگین درصد مرگ و میر لاروهای سن 1 مینوز گوچه فرنگی 45

جدول 2-4) مقدار غلظت های قارچ M.a برای لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی 45

جدول 3-4)پروبیت نتایج اولیه برای تعیین LC50.روی لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی با قارچ M.a 47

جدول4-4) میانگین درصد مرگ و میر لاروهای سن 3 مینوز گوچه فرنگی(M.a) 48

جدول 5-4) مقدار غلظت های قارچ M.a برای لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی 48

جدول 6-4) پروبیت نتایج اولیه برای تعیین LC50.روی لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی با قارچ M.a 50

جدول 7-4) میانگین درصد مرگ و میر لاروهای سن 1 مینوز گوچه فرنگی(B.b) 51

جدول 8-5) مقدار غلظت های قارچ B.b برای لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی 51

جدول 9-4) پروبیت نتایج اولیه برای تعیین LC50.روی لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی با قارچ B.b 52

جدول 10-4) میانگین درصد مرگ و میر لاروهای سن 3 مینوز گوچه فرنگی(B.b) 53

جدول 11-4) مقدار غلظت های قارچ B.b برای لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی 55

جدول 12-4) پروبیت نتایج اولیه برای تعیین LC50.روی لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی با قارچ B.b 56

جدول 13-4)میانگین درصد مرگ و میر لاروهای سن 1 مینوز گوچه فرنگی(Bt) 56

جدول14-4) مقدار غلظت های باکتری B.t برای لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی 56

جدول15-4 ) پروبیت نتایج اولیه برای تعیین LC50.روی لارو سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی با باکتری Bt 57

جدول16-4) میانگین درصد مرگ و میر لاروهای سن 3 مینوز گوچه فرنگی(Bt) 58

جدول 17-4) مقدار غلظت های باکتری Bt برای لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی 59

جدول18-4 ) پروبیت نتایج اولیه برای تعیین LC50.روی لارو سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی با باکتری Bt 60

فهرست نمودارها

عنوان صفحه

نمودار1-4) مقایسه درصد مرگ ومیراصلاح شده لارو های سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی در اثر قارچ M.a 46

نمودار 2-4) مقایسه درصد مرگ ومیراصلاح شده لارو های سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی در اثر قارچ M.a 49

نمودار3-4) مقایسه درصد مرگ ومیراصلاح شده لارو های سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی در اثر قارچ B.b 51

نمودار 4-4) مقایسه درصد مرگ ومیراصلاح شده لارو های سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی در اثر قارچ B.b 54

نمودار 5-4) مقایسه درصد مرگ ومیراصلاح شده لارو های سن 1 پروانه مینوز گوجه فرنگی در اثر باکتری Bt 56

نمودار6-4) مقایسه درصد مرگ ومیراصلاح شده لارو های سن 3 پروانه مینوز گوجه فرنگی در اثرباکتری Bt 60

فهرست شکل ها

عنوان صفحه

شکل 2-1) نقشه پراکنش و مهاجرت شب پره مینوز برگ گوجه فرنگی آز امریکای لاتین به مدیترانه و خاورمیانه 3

شکل 2- 2)حشره کامل مینوزگوجه فرنگی 4

شکل 2-3) تخم مینوز برگ گوجه فرنگی روی برگ 5

شکل 2-4) لارو مینوز برگ گوجه فرنگی 5

شکل 2-5) شفیره مینوز برگ گوجه فرنگی 6

شکل 2-6) مراحل رشدی پروانه مینوز گوجه فرنگی 6

شکل2-7) نحوه تغذیه آفت در هر مرحله رشدی 7

شکل2-8) لارومینوزبرگ گوجه فرنگی درحال خروج از دالان مادری 8

شکل9-2) آثارخسارت لارو (تونل لاروی درداخل مزوفیل) 9

شکل10-2)برگ خسارت دیده دراثرتغذیه لارو مینوز برگ گوجه فرنگی 11

شکل11-2)بوته های آلوده به مینوز گوجه فرنگی 11

شکل12- 2)مقایسه مگس مینوز با پروانه مینوز گوجه فرنگی 12

شکل 13-2) زنبور P. dignusپارازیتوئید لارو مینوز برگ گوجه فرنگی 14

شکل14-2) زنیورT. pretiosumپارازیتوئید تخم مینوز برگ گوجه فرنگی 14

شکل 15-2) تله قیفی 15

شکل16-2)تله نوری 15

شکل17-2)تله نوری شکل 15

شکل 18-2)تل دلتا 15

شکل19-2) نمونه کشت شده از قارچ B.bassiana 18

شکل20-2) ایزوله از قارچM.anisopilae 21

شکل21-2)شکل شماتیک قارچ M.anisopilae(اقتباس از www.invasive.org) 23

شکل 22-2) شکل ایزوله از قارچ M.anisopilae 23

شکل 1-3) تغذیه لارو از برگ (عکس اصلی) 38

شکل 2-3) نحوه انجام آزمایش و شمارش لاروهای مرده در پتری دیش(عکس اصلی) 38

شکل 3-3) جدا سازی لارو از بوته های آلوده جمع آوری شده(عکس اصلی) 38

شکل4-3) قارچ B.bassiana(سمت چپ)، قارچ M.anisopilae (سمت راست) 39

شکل 5-3) نحوه تقسیم بندی یک لام هموسیتو متر 41

شکل 6-3 ) نحوه استفاده از لام هموسیتومتر 41

شکل 7-3) نحوه تهیه سوسپانسیون قارچ B.bassiana(سمت راست)، قارچ M.anisopilae(سمت چپ) 42

چکیده

در سال های اخیر استفاده از عوامل میکروبی ،قارچ های بیماری زای حشرات و باکتری ها به عنوان جایگیزین سموم شیمیایی در کنترل آفات بسیار مورد توجه قرار رفته است.این ترکیبات جانشین مناسبی برای آفت کش های شیمیایی می باشند و رشد جمعیت حشره را تحت تاثیر میگذارند.در این بررسی ها سه عامل میکروبی از جمله قارچ های بیمارگر B.bassiana و M.anisopliae و باکتری Bt روی لارو سن 1و3 پروانه مینوز گوجه فرنگی مطالعه گردید.آزمایش در شرایط دمایی 27±1 و رطوبت نسبی 5±65٪در انکوباتور در5 غلظت انجام شد.. باکتری Bt بصورت فرم تجاری و قارچ B.bassiana از دانشکده کشاورزی دانشگاه رشت و M.anisopliae از موسسه گیاهپزشکی کشور تهیه و پس از شناسایی ،کشت و تهیه سوسپانسیون ،غلطت های مورد نیاز بدست آمد.در هر یک از ظروف آزمایش 20عدد لارو سن1 وسن 3 که حاوی چند برگ گوجه فرنگی قرار داده شد.بررسی ها در آزمایشات اولیه با استفاده از جدول پروبیت مقدار LC50 هر عامل ،برای هر مرحله لاروی نشان داد. میزان LC50 قارچ B.bassiana برای لارو سن 1، 5.7*108 اسپور در میلیلیتر و لارو سن 3، 108*9.4 اسپور در میلیلیتر ،قارچ M.anisopliae ،لارو سن1، 107*5.8 اسپور در میلیلیتر ،لارو سن3، 108*4.27 اسپور در میلی لیتر و باکتری Bt ،لارو سن 1، 1.5لیتر در هزار ، لارو سن3، 2 لیتر در هزار بدست آمد. بر اساس این مقادیر غلظت ها برای آزمایش نهایی محاسبه شد.بررسی ها آزمایش نهایی نشان داد، بیشترین درصد مرگ و میر لارو سن 1 مربوط به قارچ M.anisopliae با غلظت 4.3*1014 اسپور در میلیلیتر و برای لارو سن 3 ، مربوط به قارچ M.anisopliae با غلظت 1.6*1028 اسپور در میلیمتر، 4 روز بعد از تیمار بوده است.

واژه کلیدی: عوامل میکروبی ، پروانه مینوز گوجه فرنگی،Metarhizium anisopliae ،Beavueria bassiana ، باکتری B.t ، اثر حشره کشی.

مقدمه

گوجه ‌فرنگی گیاهی است با نام علمی‌ Ycopersiscom esculentum از خانواده سیب زمینی (solanaceae) که به نام عمومی‌Tomato در جهان مشهور است‌. میوه این گیاه که قسمت اصلی آن است به صورت خام یا پخته در سالاد، انواع سس‌ها، سوپ و انواع مواد غذایی به طور وسیع در جهان مورد استفاده قرار می‌گیرد‌. مهمترین ترکیبات گوجه‌فرنگی شامل حدود 90 درصد و یا کمی ‌بیشتر آب می‌باشد و بقیه آن را پروتئین، چربی، قندهای مختلف از جمله گلوکز و فروکتوز، ویتامین‌های آ، ث، کا، تیامین، ریبوفلاوین، پانتوتنیک اسید، اسید فولیک، ‌ویتامین ای، اسید آمینه‌های ضروری، املاح معدنی از جمله کلسیم، فسفر، آهن، سدیم، پتاسیم، منیزیم، مس، منگنز، کبالت، روی و آرسنیک می‌باشد و به تازگی وجود ید نیز در گوجه‌فرنگی گزارش شده است‌. طبق آمار منتشر شده از سوی اداره کل آمار و اطلاعات کشور در سال زراعی 1385-86 گوجه فرنگی در سطحی معادل 147462 هکتار ، که 146837 هکتار آن مربوط به کشت آبی میباشد. متوسط عملکرد هکتاری آن 34.3 تن بوده و محصول سالانه آن بالغ بر 5 میلیون تن می باشد.

مینوز برگ گوجه فرنگی یا بید گوجه فرنگی(Tuta absoluta) از جدی ترین و مهم ترین آفات گوجه فرنگی و سیب زمینی در دنیا محسوب می شود كه از نظر اقتصادی دارای اهمیت بالایی می باشد.
خسارت این حشره روی محصول گوجه فرنگی بین 50 تا 100 درصد می رسد. تولید مثل بالا (تا 12 نسل در سال) مینوز گوجه فرنگی را تبدیل به حشره خطرناكی كرده است.
این آفت بومی آمریكای جنوبی بوده و اخیرا از تعدادی از استان های غرب، جنوب غرب و جنوبی كشور گزارش گردیده است و می تواند تهدید جدی برای تولید گوجه فرنگی و صنایع وابسته به آن باشد. به دلیل تعداد نسل بالا در سال و تغذیه لاروها از برگ ومیوه ، استفاده از شره کش های شیمیایی تاثیر چندانی در کنترل این آفت ندارد، لذا مطالعه و تحقیق بر روی دیگر عوامل کنترل کننده آفت به لحاظ ملاحظات زیست محیطی و سلامت مصرف کنندگان از اهمیت خاصی برخوردار می باشد (بهداد،1381).

طبق آمار سازمان ملل متحد در سال 2000 ، جمعیت جهان تا سال 2050 بیش از 70٪ افزایش خواهد داشت.در این بین یکی از مشکلاتی که بروز خواهد نمود سوء تغذیه در کشورهای در حال توسعه است(بنایی و همکاران،1374). کنترل آفات بیشتر با استفاده آفت کش های شیمیایی صورت می گیرد. استفاده های مکرر از این مواد طی دهه های متوالی باعث از بین رفتن دشمنان طبیعی ، اختلال در کنترل بیولوژیکی ، اثر روی موجودات غیر هدف آلودگی محیط زیست در خطر قرار گرفتن سلامت انسان، طغیان آفات و بروز مقاومت در آفات هدف گردیده است.با توجه به خسارت های ناشی از حشرات آفت و اثرهای سوء سموم شیمیایی ، تحقیق برای دسترسی به روش ها و ترکیب های کم خطر جهت کنترل آفات اجتناب نا پذیر می باشد (Talukder,Champ & Dyte,1976). در اثر این عوامل و از طرفی دیگر با بالا رفتن سطح آگاهی عموم ، تحقیقات گسترده و مستقیمی برای توسعه استراتژی های جایگزین برای کنترل آفات از جمله مبارزه بیولوژیک در حال انجام میباشد(Brower et al,1995)

هدف از این پژوهش استخراج قارچ های بیمارگر حشرات و بررسی اثر بیماری زایی آنها و نیز بررسی باکتری دارای خاصیت حشره کشی به عنوان جایگزین سموم شیمیایی و انتخاب کشنده ترین و موثرترین دز که بتوان در برنامه های مبارزه تلفیقی با پروانه مینوز گوجه فرنگی بکار برد.

اگر چه ایران به عنوان منطقه خشک محسوب میشود و در نگاه اول استفاده از قارچ ها به عنوان عامل کنترل بیولوژیکی تحت شرایط محتمل به نظر نمی رسد ولی مطالعات نشان داده است که کشور ما از نظر فلور قارچ های بیمار گر بندپایان ، روی حشرات غنی می باشد. پتانسیل فزاینده کنترل بیولوژیک حشرات آفت طی 50 سال اخیر بیشتر در نتیجه شناسایی و توسعه گونه های جدید بیمارگر حشرات بوده است. تعدادی از این شناسایی ها اتفاقی بوده ولی اغلب آنها نتیجه بررسی های منظم و گسترده می باشند. علی رغم موفقیت های گذشته ، اگر بخواهیم که نیازهای افزایش محصولات کشاورزی و کاهش پیوسته در استفاده از سموم شیمیایی را داشته باشیم باید بطور مستمر به شناسایی و توسعه عوامل بیمارگر حشرات بپردازیم. کشاورزی پایدار در قرن بیست و یکم بطور فزاینده ای مبتنی بر کنترل بیولوژیک و سایر روش های مدیریت آفات سازگار با محیط زیست خواهد بودو

امید است نتایج حاصله راهگشای سایر پژوهشگران جهت بکارگیری این باکتری و قارچ ها در برنامه های کنترل تلفیقی آفت پروانه مینوز گوجه فرنگی باشد.

2-1)حشره آفت

پروانه مینوز گوجه فرنگیTuta absoluta

موضوعات: بدون موضوع لینک ثابت

فرم در حال بارگذاری ...

فید نظر برای این مطلب